Pruebas de laboratorio para MRSA, la infección por MRSA en la sangre.

Pruebas de laboratorio para MRSA, la infección por MRSA en la sangre.

¿Cuáles son los patrones de susceptibilidad de clínica S. aureus aislados?

Aproximadamente el 10% de S. aureus aislados en los Estados Unidos son susceptibles a la penicilina. Sin embargo, muchos S. aureus cepas, mientras resistentes a la penicilina, siguen siendo susceptibles a las penicilinas penicilinasa-estables, tales como oxacilina y la meticilina. Las cepas que son resistentes a la oxacilina y la meticilina, históricamente denominan resistente a la meticilina S. aureus (MRSA), son resistentes a todos los agentes ß-lactámicos, incluyendo las cefalosporinas y carbapenems, a pesar de que pueden ser susceptibles a la clase más nueva de las cefalosporinas de SARM-activo (por ejemplo, ceftarolina). Las cepas de MRSA que causan las infecciones asociadas a la salud a menudo son multiplican resistentes a otros agentes antimicrobianos de uso común, como eritromicina, clindamicina, fluoroquinolonas y tetraciclina, mientras que las cepas causantes de infecciones asociadas a la comunidad a menudo son resistentes sólo a ß-lactámicos agentes y eritromicina, pueden ser resistentes a las fluoroquinolonas. Desde 1996, las cepas de SARM con una susceptibilidad reducida a la vancomicina (concentración mínima inhibitoria [MIC], 4 – 8 mg / ml) y las cepas totalmente resistentes a la vancomicina (CIM ≥ 32 mg / ml) han sido reportados.

¿Cómo se deben probar los laboratorios clínicos de MRSA?

Además de las pruebas de caldo microdultion, el Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI), recomienda la prueba de disco de cefoxitina pantalla, la prueba de aglutinación de látex para PBP2a, o una placa que contiene 6 mg / ml de oxacilina en agar Mueller-Hinton suplementado con 4% NaCl métodos como alternativas de las pruebas de MRSA. Para los métodos de inoculación, ver CLSI estándar de aprobación de M100-S23 1. Además, en la actualidad hay varios agares cromogénicos selectivos aprobados por la FDA que se pueden utilizar para la detección de MRSA.

Es difícil detectar la resistencia a oxacilina / meticilina?

La detección exacta de la resistencia a oxacilina / meticilina puede ser difícil debido a la presencia de dos subpoblaciones (una susceptible y la otra resistente) que pueden coexistir dentro de una cultura de estafilococos 2. Todas las células en un cultivo puede transportar la información genética para la resistencia, pero sólo un número pequeño puede expresar la resistencia in vitro. Este fenómeno se denomina heterorresistencia y se produce en resistente a la penicilinasa estables penicilinas, tales como oxacilina estafilococos.

Las células que expresan heterorresistencia crecen más lentamente que la población susceptible a oxacilina y pueden pasarse por alto a temperaturas superiores a 35 ° C. Esta es la razón por CLSI recomienda aislamientos de incubación se ensayaron frente a la oxacilina o cefoxitina a 33-35 ° C (máximo de 35 ° C) durante 24 horas antes de la lectura 1.

¿Pueden todas las pruebas de sensibilidad a la detección de MRSA?

Cuando se usan correctamente, las pruebas basadas en agar base de caldo y por lo general pueden detectar SARM. El método de difusión en disco de cefoxitina se puede utilizar, además de los métodos de prueba de susceptibilidad de rutina o como un método de respaldo.

¿Hay pruebas adicionales para detectar la resistencia a oxacilina / meticilina?

pruebas de amplificación de ácido nucleico, tal como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se puede utilizar para detectar la mec Un gen, el gen es más común que media la resistencia a oxacilina en los estafilococos. Sin embargo, mecA pruebas de PCR no detectarán nuevos mecanismos de resistencia, tales como MECC o fenotipos no habituales, tales como la resistencia a la oxacilina limítrofe resistente.

Cómo es el mecA gen implicado en el mecanismo de la resistencia?

¿Cuáles son los puntos de corte para determinar la sensibilidad de los estafilococos a la oxacilina?

El CLSI puntos de corte para S. aureus son diferentes de aquellos para los estafilococos coagulasa negativos (ECN) 1.

Criterios de interpretación (en g / ml) para las pruebas de CIM de oxacilina

* La oxacilina prueba de difusión en disco no es fiable para la detección de la resistencia a oxacilina / meticilina. La cefoxitina se debe utilizar como un sustituto para el ensayo de difusión en disco.

¿Por qué se ponen a prueba oxacilina y cefoxitina en lugar de a la meticilina?

En primer lugar, la meticilina ya no está comercialmente disponible en los Estados Unidos. En segundo lugar, la oxacilina mantiene su actividad durante el almacenamiento mejor que la meticilina y es más probable detectar cepas heterorresistentes. Sin embargo, cefoxitina es un mejor inductor de la mecA gen, y las pruebas que utilizan cefoxitina dan resultados más reproducibles y precisos que las pruebas con oxacilina.

Si oxacilina y cefoxitina se ponen a prueba, ¿por qué se llaman los aislados «MRSA» en lugar de «ORSA»?

  1. CLSI. 2013. Normas de funcionamiento de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos. CLSI aprobó norma M100-S23. Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio, Wayne, PA.
  2. Bannerman, TL. 2003. Staphylococcus, Micrococcus y otra catalasa positiva cocos que crecen aeróbicamente. En P. R. Murray, E. J. Baron, J. H. Jorgensen, M. A. Pfaller, R. H. Yolken [eds.], Manual de Microbiología Clínica 8ª ed. ASM Press, Washington, DC

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